近年來(lái)，由副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis，Hps)所引起的豬群多發(fā)性漿膜炎和關(guān)節(jié)炎在中國(guó)各地屢有發(fā)生，對(duì)仔豬和青年豬造成嚴(yán)重危害，給養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)了巨大的經(jīng)濟(jì)損失，目前，該病已成為全球范圍內(nèi)影響?zhàn)B豬業(yè)的典型細(xì)菌性疾病。副豬嗜血桿菌血清型復(fù)雜，分離培養(yǎng)困難。為了全面認(rèn)識(shí)該病，對(duì)其病原學(xué)、病理變化、流行病學(xué)、致病因子、診斷方法、免疫防治等進(jìn)行了綜述。
副豬嗜血桿菌(Haemophilus parasuis，Hps)是豬格氏病(Glasser’S disease)的病原體，屬于巴氏桿菌科嗜血桿菌屬，是豬上呼吸道的常在菌。副豬嗜血桿菌的感染可呈多種臨床類(lèi)型，以纖維素性多發(fā)性漿膜炎、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎和腦膜炎為其臨床特征。發(fā)病年齡從2周齡至4月齡，通常多見(jiàn)于5～8周齡的仔豬。衛(wèi)生狀況良好和較為健康的豬群，一旦遭遇到應(yīng)激因素，往往更易暴發(fā)本病，感染過(guò)程往往也更為嚴(yán)重，發(fā)病率可達(dá)10%～15%，病死率可達(dá)50%(Simone等，2004)。副豬嗜血桿菌是一種機(jī)會(huì)致病菌，可以并發(fā)或繼發(fā)于豬繁殖與呼吸綜合征、偽狂犬病、細(xì)小病毒病、圓環(huán)病毒病、豬瘟等疫病，使疫情復(fù)雜化(Kim等，2002)。
1病原學(xué)
1910年，德國(guó)科學(xué)家Glasser首次報(bào)道了以纖維素性多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎和腦膜炎為特征的患病豬的漿液性分泌物中存在一種革蘭氏陰性短小桿菌。該菌曾先后被命名為豬副嗜血桿菌和豬流感嗜血桿菌，Biberstein等(1969)報(bào)道，副豬嗜血桿菌生長(zhǎng)只需要V因子，將其命名為副豬嗜血桿菌。副豬嗜血桿菌(Hps)是一種非溶血性、V因子依賴(lài)型、革蘭氏陰性細(xì)小桿菌。從病灶中新分離的菌株多呈球桿狀或雙球狀，有時(shí)為短鏈狀。在陳舊培養(yǎng)物中有長(zhǎng)桿狀和絲狀，呈多形性。Hps菌株中部分有莢膜，有莢膜的菌株呈球桿狀，無(wú)莢膜的菌株呈多形性。
副豬嗜血桿菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求嚴(yán)格，在臨床上對(duì)該菌的分離培養(yǎng)十分困難。人工培養(yǎng)時(shí)必須供給V因子或含有V因子的新鮮血液才能生長(zhǎng)。血瓊脂中的羊紅細(xì)胞含有V因子，但完整紅細(xì)胞中的V因子通常處于被抑制狀態(tài)，所以嗜血桿菌不能在血瓊脂上生長(zhǎng)，需加熱80～90℃，5～15 rain破壞細(xì)胞膜上的抑制物，使V因子釋放，因此，實(shí)驗(yàn)室分離Hps可用巧克力瓊脂培養(yǎng)基。當(dāng)與金黃色葡萄球菌一起培養(yǎng)時(shí)，葡萄球菌可分泌V因子釋放到培養(yǎng)基中，促進(jìn)Hps的生長(zhǎng)，所以靠近葡萄球菌菌落的Hps菌落較大，而遠(yuǎn)離的菌落較小，呈“衛(wèi)星現(xiàn)象”。
2病理變化
副豬嗜血桿菌病以纖維蛋白性多發(fā)性漿膜炎、多發(fā)性關(guān)節(jié)炎和腦膜炎為特征。腹膜、心包、胸膜或關(guān)節(jié)面出現(xiàn)漿液一纖維素性或纖維素性化膿性炎癥。組織學(xué)檢查這些炎癥部位可見(jiàn)嗜中性白細(xì)胞和巨嗜細(xì)胞浸潤(rùn)(Vahle等，1995)。重癥病例如腦膜炎、栓塞性腦膜腦炎，伴有腦脊液增多，肺部病變不典型。發(fā)生纖維素性化膿性腦膜炎時(shí)，蛛網(wǎng)膜腔內(nèi)積有纖維素性化膿性滲出物而導(dǎo)致腦脊髓液變渾濁。敗血癥病例可在肝臟、腎臟和腦等器官表面見(jiàn)到出血斑，同時(shí)血漿中內(nèi)毒素含量增加可引起血管內(nèi)凝結(jié)物的散布，使各器官出現(xiàn)纖維素凝塊。而伴有發(fā)紺、皮下水腫和肺水腫的急性敗血性病例不多見(jiàn)(Desrosiers等，1986)，見(jiàn)不到典型的漿膜炎癥表現(xiàn)。關(guān)節(jié)炎表現(xiàn)為關(guān)節(jié)周?chē)M織發(fā)炎和水腫，關(guān)節(jié)囊腫大，關(guān)節(jié)液增多、渾濁，內(nèi)含呈黃綠色的纖維素性化膿性滲出物。
3流行病學(xué)
Hps是豬上呼吸道的常在菌，正常條件下并不表現(xiàn)癥狀，但在各種應(yīng)激因素和致病條件下破壞上呼吸道的防御機(jī)制，引起上呼吸道黏膜表面纖毛活動(dòng)的顯著降低，歡迎訪問(wèn)豬場(chǎng)動(dòng)力網(wǎng)。損傷纖毛上皮，引起化膿性鼻炎、病灶處纖毛丟失以及鼻黏膜和支氣管黏膜細(xì)胞的急性腫脹。黏膜的損傷可能會(huì)增加細(xì)菌和病毒的入侵機(jī)會(huì)，使敏感豬發(fā)牛全身感染。
近年來(lái)，在豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、豬圓環(huán)病毒(PCV)、豬偽狂犬病病毒(PRV)和豬流感病毒(SIV)感染引起的病例中，該菌的分離率明顯增高，在漿液性一纖維蛋白性多發(fā)性漿膜炎病例中的分離率也逐漸增加。Narita等(1994)報(bào)道豬偽狂犬病病毒可使感染豬發(fā)牛壞死性細(xì)支氣管炎和肺泡炎，從而推測(cè)PRV可能破壞呼吸道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致Hps在肺臟增殖。Kim等(2002)研究了與斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征(PMwS)共感染的病原微生物，113個(gè)雙重感染病例中，PCV2和Hps聯(lián)合最為普遍，為43個(gè)。Solano等(1998)用H聲s對(duì)PRRSV感染豬進(jìn)行氣管內(nèi)攻毒，研究結(jié)果表明，PRRSV感染的初期，肺泡巨噬細(xì)胞能正常吞入副豬嗜血桿菌，在感染PRRSV 168 h和216 h后感染豬的巨噬細(xì)胞殺死Hps和產(chǎn)生超氧化離子的能力顯著降低。蔡旭旺等(2005)報(bào)道了中國(guó)豬場(chǎng)Hps與其他細(xì)菌的協(xié)同感染情況，183例Hps感染病例中有34.4%只感染了Hps，37.7%感染了兩種細(xì)菌，24.0%感染了3種細(xì)菌，38.4%感染了4種細(xì)菌，其中與Hps協(xié)同感染的豬鏈球菌占30.6%，大腸桿菌占21.9%，支氣管敗血波氏菌占21.3%，多殺性巴氏桿菌占14.2%，腸道沙門(mén)氏菌占4.4%，金黃色葡萄球菌占3.8%，胸膜肺炎放線桿菌占1.1%。在這些感染中，Hps是作為觸發(fā)因子還是繼發(fā)感染，有待進(jìn)一步研究。
近年來(lái)，副豬嗜血桿菌病在中國(guó)大部分地區(qū)危害日趨嚴(yán)重，豬場(chǎng)動(dòng)力網(wǎng)www.powerpigs.net中國(guó)最專(zhuān)業(yè)的養(yǎng)豬技術(shù)網(wǎng)站。這可能與該菌的血清型多且無(wú)交叉免疫力有關(guān)。按Kieletein—Rapp-Gabrielson(KRG)血清分型方法(Kielstein等，1992)，副豬嗜血桿菌至少有15種血清型，其中血清1、5、10、12、13、14型毒力最強(qiáng)，患豬死亡或處于瀕死狀態(tài);血清2、4、8、15型具有中等毒力，患豬死亡率低，但生長(zhǎng)遲緩;血清3、6、7、9、11型不能引起臨床感染。從世界范圍看，血清4、5、13型最為流行，日本、德國(guó)、美國(guó)等以血清4、5型最為常見(jiàn)，澳大利亞分離的菌株主要為血清5、13型，但有大約20%的分離菌尚無(wú)法定型。位于豬體不同部位的菌株，其血清型可能不同。據(jù)報(bào)道，血清3型主要存在于豬的上呼吸道，所以其毒力可能低;而在肺炎病變區(qū)及多發(fā)性關(guān)節(jié)炎腔等部位分離的菌株主要是血清4、5型，如美國(guó)和加拿大從發(fā)病動(dòng)物分離的菌株大約40%為血清4或5型，說(shuō)明這兩個(gè)血清型為主要的流行致病株。傳統(tǒng)的血清分型方法是根據(jù)熱穩(wěn)定性可溶性抗原間接血凝試驗(yàn)(IHA)和瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(AGPT)來(lái)進(jìn)行。Tadjine等(2004)報(bào)道，將副豬嗜血桿菌全細(xì)胞懸液煮沸，以上清為抗原制備抗血清，15個(gè)標(biāo)準(zhǔn)株的間接血凝試驗(yàn)和免疫擴(kuò)散試驗(yàn)都顯示了較高的特異性，僅5型和1型在免疫擴(kuò)散試驗(yàn)中出現(xiàn)交叉反應(yīng);Turni等(2005)用間接血凝和凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)對(duì)副豬嗜血桿菌血清學(xué)分型進(jìn)行比較。試驗(yàn)了15個(gè)血清型參考株、72個(gè)澳大利亞分離株、9個(gè)中國(guó)分離株。用IHA可以將15個(gè)參考株中的14個(gè)進(jìn)行正確分型，將81個(gè)分離株中的45個(gè)進(jìn)行血清學(xué)分型；而凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)可以將15個(gè)參考株中的13個(gè)進(jìn)行正確分型，將81個(gè)分離株中的48個(gè)進(jìn)行血清學(xué)分型。
